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青貯有機(jī)酸檢測方法
來源: | 作者:上海優(yōu)選生物 | 發(fā)布時(shí)間: 2025-03-27 | 25 次瀏覽 | 分享到:
青貯有機(jī)酸是將新鮮的植物收集起來并壓實(shí),和外界隔絕空氣,在微生物如大腸桿菌、霉菌、酵母菌等作用下,進(jìn)行厭氧發(fā)酵,產(chǎn)生了一系列的有機(jī)酸。青貯材料有玉米,高粱,草類,豆類等,所產(chǎn)生的有機(jī)酸包括甲酸,乙酸,丙酸,丁酸,乳酸,山梨酸,苯甲酸等。青貯有機(jī)酸能夠降低環(huán)境的pH值,在一定程度上抑制了微生物的生長和繁殖。青貯一般是用做飼料的,通過檢測青貯飼料中的有機(jī)酸含量,可以及時(shí)了解飼料的發(fā)酵程度和質(zhì)量狀況。有機(jī)酸含量過高或過低都可能影響飼料的營養(yǎng)價(jià)值和保存期限。

青貯有機(jī)酸是將新鮮的植物收集起來并壓實(shí),和外界隔絕空氣,在微生物如大腸桿菌、霉菌、酵母菌等作用下,進(jìn)行厭氧發(fā)酵,產(chǎn)生了一系列的有機(jī)酸。青貯材料有玉米,高粱,草類,豆類等,所產(chǎn)生的有機(jī)酸包括甲酸,乙酸,丙酸,丁酸,乳酸,山梨酸,苯甲酸等。青貯有機(jī)酸能夠降低環(huán)境的pH值,在一定程度上抑制了微生物的生長和繁殖。青貯一般是用做飼料的,通過檢測青貯飼料中的有機(jī)酸含量,可以及時(shí)了解飼料的發(fā)酵程度和質(zhì)量狀況。有機(jī)酸含量過高或過低都可能影響飼料的營養(yǎng)價(jià)值和保存期限。



實(shí)驗(yàn)室檢測青貯有機(jī)酸的含量,根據(jù)具體有機(jī)酸來確定方法。常用到的有高效液相色譜(HPLC)法、氣相色譜(GC)法等。以HPLC為例,用乳酸,乙酸,丙酸,丁酸為標(biāo)準(zhǔn)品,測定青貯中的有機(jī)酸含量。


前處理:稱取青貯樣品20g,放到一個(gè)容器中,加入180mL的水,用組織搗碎機(jī)勻漿1min。用4層的紗布粗過濾,在用濾紙過濾,浸提液用0.45um微孔濾膜過濾待測。



色譜條件:C18色譜柱,250mm長,4.6mm內(nèi)徑,5um粒徑,柱溫20-25℃;以磷酸二氫鉀(用磷酸調(diào)pH值)和甲醇為流動相,梯度洗脫,流速為1ml/min,紫外檢測器,波長為215nm,進(jìn)樣量10-20uL。也有用離子交換色譜柱,55℃,2.5mmol/L的硫酸溶液的流動相,流速0.6ml/min,紫外檢測器,210nm,進(jìn)樣量10uL。



標(biāo)準(zhǔn)曲線:將4種標(biāo)準(zhǔn)品,進(jìn)行溶解,梯度稀釋6個(gè)濃度點(diǎn),保持在檢測器的有效檢測范圍內(nèi)。按色譜條件,進(jìn)樣到HPLC,在軟件中記錄各個(gè)色譜峰。以色譜峰面積為縱坐標(biāo),對應(yīng)有機(jī)酸的各個(gè)濃度點(diǎn)為橫坐標(biāo),繪制出標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到回歸方程。r2>0.999,確保測試數(shù)據(jù)的有效性。在很多的文獻(xiàn)中,需要對色譜條件進(jìn)驗(yàn)證和優(yōu)化,測定實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性,精密度,加標(biāo)回收率等。


樣品測定:將樣品注入到HPLC中,對應(yīng)的色譜峰的出峰時(shí)間是一致的,得到相應(yīng)的峰面積。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程,計(jì)算出樣品中的各種有機(jī)酸的含量。


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